工作原理:
在PCR反应体系中,加入过量的荧光染料,荧光染料掺入DNA或蛋白后,发射荧光信号,而未掺入的染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。
应用领域:
实时荧光定量PCR检测技术广泛应用于各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价;地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测;肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断;遗传基因检测实现遗传病诊断。